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SNAP-8 10 mg

Récupération & peau

SNAP-8

Le SNAP-8 est un octapeptide de synthèse acétylé et amidé, référencé sous le nom INCI Acetyl Octapeptide-3. Sa séquence reproduit un segment du domaine N-terminal de la protéine SNAP-25 (résidus 12 à 19), l'un des trois partenaires du complexe SNARE. Il est étudié in vitro comme peptide compétiteur de l'assemblage de ce complexe et comme version allongée de l'acétyl hexapeptide-8.

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Dosage
10 mg
Conservation
2–8 °C
Expédition
24–48 h

Le produit

À quoiil sert.

L'exocytose des vésicules synaptiques suppose l'assemblage du complexe SNARE, formé de la syntaxine, de VAMP et de SNAP-25. Le SNAP-8 reproduit les résidus 12 à 19 du domaine N-terminal de SNAP-25 et est décrit comme entrant en compétition avec la protéine entière lors de cet assemblage, modifiant la libération de neurotransmetteur dans les systèmes d'essai, mesurée sur catécholamines dans les travaux sur cellules chromaffines. Cette famille de peptides biomimétiques a été mise au point par Lipotec dans les années 2000, en prolongeant de deux résidus, Ala et Asp, la séquence de l'acétyl hexapeptide-8, mieux connue sous son nom commercial d'Argireline.

Les travaux publiés relèvent de la neurobiologie cellulaire et de la chimie des peptides biomimétiques : essais de libération de neurotransmetteur sur cellules chromaffines, mesures de compétition sur complexes SNARE reconstitués, essais de diffusion sur modèles de peau reconstruite et sur explants cutanés. L'acétylation de l'extrémité N-terminale et l'amidation de l'extrémité C-terminale reproduisent l'environnement chimique d'un fragment interne de protéine et limitent l'action des exopeptidases.

Carte d'identité

Numéro CAS
868844-74-0
Formule brute
C41H70N16O16S
Masse molaire
1075,16 g/mol
Séquence
Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-Ala-Asp-NH2 (Ac-EEMQRRAD-NH2)
Autres noms
Acetyl Octapeptide-3 (INCI) · Acétyl octapeptide-3 · SNAP 8 · Ac-EEMQRRAD-NH2 · SNAP-25 (12-19)

Conservation

Stockez le lyophilisat à -20 °C, flacon scellé, à l'abri de la lumière et de l'air. La méthionine en troisième position rend ce peptide plus sensible à l'oxydation que la moyenne : limitez les ouvertures répétées du flacon et refermez-le sans délai. Reconstitué, il se garde à 2-8 °C pour un emploi rapide, de l'ordre de la semaine à deux semaines, ou en aliquotes congelées à -20 °C. Réduisez au minimum les cycles de congélation-décongélation, qui multiplient les interfaces où l'oxydation s'amorce.

Manipulation en laboratoire

Employez de l'eau ultrapure fraîchement dégazée et écartez tout solvant susceptible de contenir des peroxydes ou un oxydant résiduel : la méthionine s'oxyde en sulfoxyde et le peptide change alors de masse. Faites couler le solvant contre la paroi interne, laissez la poudre se dissoudre, puis tournez doucement le flacon ; ni vortex ni agitation, qui incorporent de l'oxygène en même temps qu'ils font mousser. Aliquotez immédiatement en petits volumes, remplissez les flacons à ras ou sous gaz inerte si vous en disposez, étiquetez et datez, et conservez à l'abri de la lumière. Gants et pipettes étalonnées.

Questions sur ce produit

  • Les six premiers résidus sont identiques : l'acétyl hexapeptide-8 est Ac-EEMQRR-NH2, le SNAP-8 y ajoute une alanine et un aspartate, soit Ac-EEMQRRAD-NH2. L'allongement étend la correspondance avec le segment 12-19 du domaine N-terminal de SNAP-25, dont l'hexapeptide ne couvre que les six premiers résidus. Les deux composés sont étudiés sur les mêmes systèmes de compétition SNARE ; ce sont deux molécules distinctes, portant des numéros CAS différents.

  • L'acétylation du N-terminal et l'amidation du C-terminal neutralisent les charges des extrémités libres et reproduisent l'environnement chimique d'un fragment pris à l'intérieur d'une protéine, ce qu'est bien le segment 12-19 de SNAP-25, situé en retrait du N-terminus réel et non à l'extrémité de la chaîne. Ces modifications réduisent aussi la prise des exopeptidases sur la chaîne. Un lot dépourvu de ces groupements n'est pas le même produit et se repère à sa masse.

  • La méthionine en position 3 s'oxyde facilement en méthionine sulfoxyde, ce qui ajoute 16 Da à la masse du peptide. Le décalage est visible en spectrométrie de masse et constitue le contrôle de qualité le plus parlant sur ce composé. Un lot partiellement oxydé fausse les essais de compétition, puisque la position concernée appartient au motif reconnu.

Protocole

Du flacon à la solution.

La mise en œuvre d'un flacon de 10 mg : combien d'eau bactériostatique ajouter, ce que l'on obtient, et comment le garder. Ce protocole porte sur la préparation et la conservation au laboratoire — il ne prescrit aucun schéma d'administration.

  1. 01

    Ajouter l'eau

    2 ml d'eau bactériostatique, versés lentement contre la paroi du flacon, jamais directement sur la poudre.

  2. 02

    Dissoudre

    Faites tourner doucement le flacon entre les doigts jusqu'à ce que la solution soit limpide. Ne secouez pas : l'agitation dénature le peptide et fait mousser.

  3. 03

    Ce que l'on obtient

    Une solution à 5.00 mg/ml, limpide. Un trouble ou un dépôt qui persiste signale un problème : ne l'utilisez pas.

Avant reconstitution

Stockez le lyophilisat à -20 °C, flacon scellé, à l'abri de la lumière et de l'air. La méthionine en troisième position rend ce peptide plus sensible à l'oxydation que la moyenne : limitez les ouvertures répétées du flacon et refermez-le sans délai. Reconstitué, il se garde à 2-8 °C pour un emploi rapide, de l'ordre de la semaine à deux semaines, ou en aliquotes congelées à -20 °C. Réduisez au minimum les cycles de congélation-décongélation, qui multiplient les interfaces où l'oxydation s'amorce.

Après reconstitution

Au réfrigérateur, entre 2 et 8 °C, à l'abri de la lumière. La solution se garde nettement moins longtemps que la poudre. Pour un stockage long, répartissez-la en aliquotes à usage unique et congelez-les : chaque cycle de congélation et décongélation dégrade un peu le peptide.

Manipulation

Employez de l'eau ultrapure fraîchement dégazée et écartez tout solvant susceptible de contenir des peroxydes ou un oxydant résiduel : la méthionine s'oxyde en sulfoxyde et le peptide change alors de masse. Faites couler le solvant contre la paroi interne, laissez la poudre se dissoudre, puis tournez doucement le flacon ; ni vortex ni agitation, qui incorporent de l'oxygène en même temps qu'ils font mousser. Aliquotez immédiatement en petits volumes, remplissez les flacons à ras ou sous gaz inerte si vous en disposez, étiquetez et datez, et conservez à l'abri de la lumière. Gants et pipettes étalonnées.

Et pour un autre volume d'eau

Le calculateur est pré-rempli sur un flacon de 10 mg. Changez le volume d'eau pour voir ce que donne chaque prélèvement, lu en graduations de seringue à insuline.

Le flacon

1232 ml5.00 mg/ml

La seringue — Prélèvement montré : 0.5 mg

02040608010010.0 u · 0.100 ml

Ce que donnent quelques prélèvements

PrélèvementGraduationsLecture
0.1 mg2acceptable
0.25 mg5bonne
0.5 mg10idéale
1 mg20idéale
2 mg40idéale
5 mg100bonne

Calcul de dilution. Il dit combien de liquide prélever pour un nombre de milligrammes donné — rien d'autre. Produits réservés à la recherche en laboratoire.

Procédure

Trois étapes.Sans compte.

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