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par flacon
Longévité & GH
Glutathion
Tripeptide formé de glutamate, de cystéine et de glycine, le glutathion réduit est l'antioxydant intracellulaire le plus abondant des cellules de mammifère. Le flacon contient 1500 mg de poudre lyophilisée. Il sert de substrat, d'étalon et de réducteur dans les travaux sur l'équilibre redox, sur la détoxification de phase II et sur la mélanogenèse.
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1
- Commande sans compte
- Expédition sous 24–48 h
- Colis discret
- 1500 mg
- 2–8 °C
- 24–48 h
Le produit
À quoiil sert.
Repéré dès 1888 par Jules de Rey-Pailhade, qui l'avait nommé philothion, il a été isolé puis caractérisé par Frederick Gowland Hopkins dans les années 1920. Sa particularité structurale est la liaison peptidique établie par la chaîne latérale γ du glutamate : elle le rend inattaquable par les aminopeptidases ordinaires et réserve sa dégradation à la γ-glutamyl transpeptidase.
Toute son activité tient au thiol de la cystéine. Deux molécules s'oxydent en disulfure GSSG, que la glutathion réductase ramène à l'état réduit aux dépens du NADPH ; le rapport GSH/GSSG est de ce fait le marqueur le plus employé du stress oxydant cellulaire. Le glutathion est le cofacteur de la glutathion peroxydase, le donneur des glutathion-S-transférases qui conjuguent les électrophiles en phase II, et le support de la glutathionylation réversible des protéines. Les modèles précliniques classiques relient la déplétion hépatique en glutathion à la toxicité du paracétamol chez la souris. Un autre versant, propre à la pigmentation, est étudié in vitro : inhibition de la tyrosinase et déplacement de la synthèse de l'eumélanine vers la phéomélanine.
- 70-18-8
- C10H17N3O6S
- 307,32 g/mol
- γ-L-Glu-L-Cys-Gly (forme réduite, GSH)
- GSH · Glutathion réduit · L-Glutathion · γ-glutamylcystéinylglycine
Poudre : à l'abri de l'air et de l'humidité, 2-8 °C pour l'usage courant, -20 °C pour un stockage long ; un flacon scellé reste stable des années au froid, un flacon ouvert et laissé à température ambiante s'oxyde lentement. En solution, l'échelle de temps change du tout au tout : l'oxydation se compte en heures. Préparez donc les solutions au moment de l'emploi ; si vous devez les conserver, aliquotez et congelez à -20 °C, à pH légèrement acide.
Le point critique n'est pas la température mais l'oxygène et les métaux : les traces de cuivre et de fer catalysent l'oxydation du thiol en GSSG. Utilisez de l'eau de qualité analytique et, si le protocole le permet, un chélateur type EDTA. Dissolvez sans agitation prolongée, qui ne fait qu'incorporer de l'air dans le liquide. Contrôlez l'état réduit du lot au réactif d'Ellman (DTNB, lecture à 412 nm) avant toute série de mesures : une poudre correcte donne un titre en thiol proche de la valeur théorique, une poudre vieillie non.
Questions sur ce produit
Parce qu'il agit sur la même voie, mais en sens inverse des mélanocortines. Les travaux in vitro le décrivent comme inhibiteur de la tyrosinase et comme facteur orientant la synthèse de l'eumélanine vers la phéomélanine. Il est donc souvent employé comme contrepoint expérimental dans les études de mélanogenèse.
Le dosage d'Ellman au DTNB donne en quelques minutes le titre en thiols libres, lu à 412 nm. Une séparation par HPLC permet, elle, de quantifier séparément le GSH et le GSSG et donc de calculer le rapport des deux. Ces contrôles valent la peine dès qu'un flacon a été ouvert plusieurs fois.
Le GSSG est le dimère oxydé : deux molécules de glutathion reliées par un pont disulfure entre leurs cystéines, pour une masse voisine de 612 g/mol. Il n'a plus de thiol libre et ne peut donc pas jouer le rôle de réducteur. Dans une cellule saine, la quasi-totalité du pool est sous forme réduite, ce qui rend le rapport GSH/GSSG très sensible au stress oxydant.
Protocole
Du flacon à la solution.
La mise en œuvre d'un flacon de 1500 mg : combien d'eau bactériostatique ajouter, ce que l'on obtient, et comment le garder. Ce protocole porte sur la préparation et la conservation au laboratoire — il ne prescrit aucun schéma d'administration.
- 01
Ajouter l'eau
2.5 ml d'eau bactériostatique, versés lentement contre la paroi du flacon, jamais directement sur la poudre.
- 02
Dissoudre
Faites tourner doucement le flacon entre les doigts jusqu'à ce que la solution soit limpide. Ne secouez pas : l'agitation dénature le peptide et fait mousser.
- 03
Ce que l'on obtient
Une solution à 600.00 mg/ml, limpide. Un trouble ou un dépôt qui persiste signale un problème : ne l'utilisez pas.
Avant reconstitution
Poudre : à l'abri de l'air et de l'humidité, 2-8 °C pour l'usage courant, -20 °C pour un stockage long ; un flacon scellé reste stable des années au froid, un flacon ouvert et laissé à température ambiante s'oxyde lentement. En solution, l'échelle de temps change du tout au tout : l'oxydation se compte en heures. Préparez donc les solutions au moment de l'emploi ; si vous devez les conserver, aliquotez et congelez à -20 °C, à pH légèrement acide.
Après reconstitution
Au réfrigérateur, entre 2 et 8 °C, à l'abri de la lumière. La solution se garde nettement moins longtemps que la poudre. Pour un stockage long, répartissez-la en aliquotes à usage unique et congelez-les : chaque cycle de congélation et décongélation dégrade un peu le peptide.
Manipulation
Le point critique n'est pas la température mais l'oxygène et les métaux : les traces de cuivre et de fer catalysent l'oxydation du thiol en GSSG. Utilisez de l'eau de qualité analytique et, si le protocole le permet, un chélateur type EDTA. Dissolvez sans agitation prolongée, qui ne fait qu'incorporer de l'air dans le liquide. Contrôlez l'état réduit du lot au réactif d'Ellman (DTNB, lecture à 412 nm) avant toute série de mesures : une poudre correcte donne un titre en thiol proche de la valeur théorique, une poudre vieillie non.
Et pour un autre volume d'eau
Le calculateur est pré-rempli sur un flacon de 1500 mg. Changez le volume d'eau pour voir ce que donne chaque prélèvement, lu en graduations de seringue à insuline.
Ce que donnent quelques prélèvements
| Prélèvement | Graduations | Lecture |
|---|---|---|
| 0.1 mg | 0 | trop fine |
| 0.25 mg | 0 | trop fine |
| 0.5 mg | 0.1 | trop fine |
| 1 mg | 0.2 | trop fine |
| 2 mg | 0.3 | trop fine |
| 5 mg | 0.8 | trop fine |
- Moins de deux graduations : la précision de lecture pèserait plus que le prélèvement lui-même. Diluez davantage.
- Au-delà de 20 mg/ml, la dissolution est lente et les petits prélèvements deviennent difficiles à lire.
Calcul de dilution. Il dit combien de liquide prélever pour un nombre de milligrammes donné — rien d'autre. Produits réservés à la recherche en laboratoire.
Procédure
Trois étapes.Sans compte.
- 01
Sélectionnez
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- 02
Commandez
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- 03
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