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Longévité & GH
HGH Somatropine
La somatropine est l'hormone de croissance humaine (GH) produite par génie génétique : une chaîne unique de 191 acides aminés, d'environ 22 kDa, repliée en faisceau de quatre hélices et tenue par deux ponts disulfure, de séquence identique à celle de la GH hypophysaire. Elle est proposée en flacons lyophilisés de 24 UI et de 36 UI, soit environ 8 et 12 mg selon l'équivalence de l'étalon international de l'OMS (3 UI par mg). Elle sert de ligand de référence du récepteur de la GH et de l'axe GH–IGF-1 en culture cellulaire et en modèle animal.
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Le produit
À quoiil sert.
Longtemps extraite d'hypophyses humaines prélevées post mortem, l'hormone de croissance compte parmi les premières protéines humaines obtenues par génie génétique : Goeddel et ses collègues en décrivent l'expression directe chez Escherichia coli dans Nature en 1979. En avril 1985, la distribution de la GH d'origine hypophysaire a été suspendue aux États-Unis après la description de cas de maladie de Creutzfeldt-Jakob chez des personnes qui l'avaient reçue ; la forme recombinante l'a remplacée, et la somatropine de 191 acides aminés dispose d'une autorisation américaine depuis 1987. Le produit vendu ici est un réactif de recherche.
La chaîne se replie en un faisceau de quatre hélices α, fermé par deux ponts disulfure, Cys53–Cys165 et Cys182–Cys189. En 1992, de Vos, Ultsch et Kossiakoff ont résolu dans Science la structure cristalline de l'hormone liée au domaine extracellulaire de son récepteur : une molécule de GH engage deux molécules de récepteur, par deux sites distincts. Cette dimérisation active la tyrosine kinase JAK2 associée au récepteur (Argetsinger et coll., Cell, 1993), puis les facteurs de transcription STAT, STAT5 en tête ; dans le foie, elle commande la production d'IGF-1, qui relaie une large part des effets décrits sur la croissance. La littérature distingue ainsi les effets directs de la GH, notamment sur le métabolisme des lipides et du glucose, de ceux qui passent par l'IGF-1.
Les modèles de recherche vont des hépatocytes, adipocytes et myoblastes en culture aux rongeurs hypophysectomisés ou déficients en GH. La GH circulante est éliminée rapidement : les données d'autorisation américaines rapportent chez l'adulte sain une demi-vie terminale d'environ 0,4 heure après administration intraveineuse. L'unité internationale est définie par l'étalon de l'OMS (code NIBSC 98/574), auquel est attribuée une activité de 3,0 UI par mg de somatropine. Il existe enfin une isoforme naturelle de 20 kDa, issue d'un épissage alternatif qui retire les résidus 32 à 46 ; le flacon contient la forme principale de 22 kDa.
- 12629-01-5
- C990H1528N262O300S7
- 22 124,8 g/mol
- FPTIPLSRLFDNAMLRAHRLHQLAFDTYQEFEEAYIPKEQKYSFLQNPQTSLCFSESIPTPSNREETQQKSNLELLRISLLLIQSWLEPVQFLRSVFANSLVYGASDSNVYDLLKDLEEGIQTLMGRLEDGSPRTGQIFKQTYSKFDTNSHNDDALLKNYGLLYCFRKDMDKVETFLRIVQCRSVEGSCGF (191 résidus, de Phe1 à Phe191 ; ponts disulfure Cys53–Cys165 et Cys182–Cys189 ; séquence identique à la GH hypophysaire humaine, UniProt P01241, résidus 27 à 217 du précurseur)
- Somatropine · Somatropin · Somatotropine · hGH · rhGH · Hormone de croissance humaine recombinante · GH 22 kDa
Lyophilisat : 2 à 8 °C pour un usage dans les mois qui suivent, −20 °C pour une garde plus longue, flacon scellé et à l'abri de la lumière ; éviter toute exposition prolongée à la chaleur. Après reconstitution : 2 à 8 °C, à l'obscurité, et emploi sous deux à quatre semaines selon le solvant retenu. La congélation d'une solution de GH favorise l'agrégation : si elle est nécessaire, aliquoter en une fois, congeler à −80 °C et ne décongeler chaque aliquote qu'une fois. Les voies de dégradation décrites pour la somatropine sont l'oxydation des méthionines 14 et 125 et la désamidation de l'asparagine 149.
Verser le solvant lentement contre la paroi du flacon, sans viser la pastille, puis faire tourner doucement jusqu'à dissolution complète ; ni vortex, ni secousse, ni mousse, qui dénaturent et agrègent la protéine. Contrôler la limpidité : une solution trouble ou porteuse de particules est écartée. Exclure des tampons les agents réducteurs (DTT, TCEP, β-mercaptoéthanol), qui ouvrent les deux ponts disulfure, ainsi que les pH alcalins, qui accélèrent la désamidation. Aliquoter dans des tubes à faible adsorption et dater chaque tube. Réservé à l'usage de laboratoire.
Questions sur ce produit
L'étalon international de l'OMS pour la somatropine (NIBSC 98/574) fixe l'équivalence à 3,0 UI par mg de protéine monomère. Le flacon de 24 UI correspond ainsi à environ 8 mg, celui de 36 UI à environ 12 mg : même protéine, quantité différente. Le certificat d'analyse du lot indique la teneur et la pureté mesurées, qui servent de base à tout calcul de concentration.
Sa séquence de 191 acides aminés est identique à celle de la forme principale, de 22 kDa, sécrétée par l'hypophyse, ponts disulfure compris. Elle se distingue de la toute première GH recombinante, la somatrem, qui portait une méthionine N-terminale supplémentaire, soit 192 résidus. L'hypophyse produit par ailleurs une isoforme minoritaire de 20 kDa, absente de ce flacon.
Parce qu'il s'agit d'une protéine de 22 kDa et non d'un peptide court. L'agitation, la mousse et les cycles de congélation-décongélation favorisent l'agrégation, et une protéine agrégée ne retrouve pas sa structure. En solution, les méthionines 14 et 125 s'oxydent et l'asparagine 149 se désamide : ces variants se repèrent en chromatographie et en spectrométrie de masse. Une solution trouble est écartée.
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