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NAD+ 500 mg

Longévité & GH

NAD+

Le NAD+ n'est pas un peptide mais un dinucléotide pyridinique, coenzyme présent dans toutes les cellules vivantes, où il transporte les hydrures des réactions d'oxydoréduction. Il est aussi le substrat consommé des sirtuines, des PARP et de la CD38. Au laboratoire, il sert de cosubstrat dans les dosages enzymatiques et de variable centrale dans les travaux sur le métabolisme et la sénescence.

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  • Colis discret
Dosage
500 mg
Conservation
2–8 °C
Expédition
24–48 h

Le produit

À quoiil sert.

Arthur Harden et William Young décrivent dès 1906 un facteur dialysable indispensable à la fermentation, qu'ils nomment cozymase. Hans von Euler-Chelpin en établit la structure dinucléotidique dans les années 1920, Otto Warburg en identifie en 1936 le rôle exact : le transfert d'un ion hydrure sur le cycle nicotinamide. Le couple NAD+/NADH est depuis l'un des piliers de la bioénergétique, alimenté en électrons par la glycolyse, le cycle de Krebs et la bêta-oxydation, et vidé par la chaîne respiratoire.

Le second rôle du NAD+ a été reconnu plus tard : il est clivé, donc consommé, par trois familles d'enzymes — les sirtuines SIRT1 à SIRT7, désacétylases dépendantes du NAD+, les PARP mobilisées lors des cassures de l'ADN, et les ectoenzymes CD38 et CD157. La cellule le régénère par la voie de sauvetage à partir du nicotinamide via la NAMPT et les NMNAT, par la voie de Preiss-Handler à partir de l'acide nicotinique, et de novo à partir du tryptophane. La baisse du NAD+ tissulaire avec l'âge, décrite chez le nématode, la drosophile et le rongeur, structure l'essentiel des axes de recherche actuels.

Carte d'identité

Numéro CAS
53-84-9
Formule brute
C21H27N7O14P2
Masse molaire
663,43 g/mol
Autres noms
Nicotinamide adénine dinucléotide · β-NAD · NAD oxydé · Coenzyme I · Cozymase · Diphosphopyridine nucléotide (DPN)

Conservation

Poudre : -20 °C, flacon scellé avec dessiccant, à l'abri de la lumière. Le NAD+ est hygroscopique et se dégrade à l'humidité comme à la chaleur ; laissez toujours le flacon revenir à température ambiante avant de l'ouvrir. En solution, il est nettement moins stable que sous forme solide : préparez au moment de l'emploi. Il résiste mieux en milieu légèrement acide et se dégrade vite à pH alcalin, à l'inverse du NADH. Une solution neutre conservée à 2-8 °C se compte en jours, en aliquotes à -20 °C en quelques semaines.

Manipulation en laboratoire

Pesez rapidement, la poudre captant l'humidité ambiante, et refermez le flacon sous dessiccant. Dissolvez dans de l'eau de qualité laboratoire ou un tampon, à froid de préférence, sans chauffer ni passer longuement au vortex. Contrôlez le pH de la solution finale et évitez les tampons alcalins. Aliquotez et congelez immédiatement, en limitant les cycles. L'état d'une solution se vérifie par spectrophotométrie : le NAD+ absorbe à 259 nm, et l'apparition d'une bande à 340 nm signale la forme réduite. Réservé à un usage de recherche en laboratoire.

Questions sur ce produit

  • NAD+ et NADH sont les deux faces d'un même couple, forme oxydée et forme réduite, qui s'interconvertissent en permanence dans la cellule. Le NMN (nicotinamide mononucléotide) et le NR (nicotinamide riboside) se situent en amont : ce sont des précurseurs de la voie de sauvetage. Le NMN est converti en NAD+ par les NMNAT ; le NR doit d'abord être phosphorylé en NMN par les nicotinamide riboside kinases (NRK1 et NRK2). Ces quatre composés ne sont donc pas interchangeables dans un protocole.

  • Le NADH absorbe à 340 nm, le NAD+ pratiquement pas. La variation de densité optique à cette longueur d'onde suit donc directement l'apparition ou la disparition de la forme réduite, ce qui fait du couple NAD+/NADH le rapporteur optique de centaines de dosages enzymatiques. Le coefficient d'extinction molaire du NADH y vaut environ 6 220 L·mol⁻¹·cm⁻¹.

  • Les deux formes circulent dans le commerce et leur masse molaire diffère : la base libre pèse 663,43 g/mol, le sel disodique davantage. Une pesée conduite avec la mauvaise valeur introduit une erreur de plusieurs pour cent sur la concentration finale. Le certificat d'analyse du lot indique la forme exacte et la pureté ; c'est lui qui fait foi pour les calculs.

Protocole

Du flacon à la solution.

La mise en œuvre d'un flacon de 500 mg : combien d'eau bactériostatique ajouter, ce que l'on obtient, et comment le garder. Ce protocole porte sur la préparation et la conservation au laboratoire — il ne prescrit aucun schéma d'administration.

  1. 01

    Ajouter l'eau

    2.5 ml d'eau bactériostatique, versés lentement contre la paroi du flacon, jamais directement sur la poudre.

  2. 02

    Dissoudre

    Faites tourner doucement le flacon entre les doigts jusqu'à ce que la solution soit limpide. Ne secouez pas : l'agitation dénature le peptide et fait mousser.

  3. 03

    Ce que l'on obtient

    Une solution à 200.00 mg/ml, limpide. Un trouble ou un dépôt qui persiste signale un problème : ne l'utilisez pas.

Avant reconstitution

Poudre : -20 °C, flacon scellé avec dessiccant, à l'abri de la lumière. Le NAD+ est hygroscopique et se dégrade à l'humidité comme à la chaleur ; laissez toujours le flacon revenir à température ambiante avant de l'ouvrir. En solution, il est nettement moins stable que sous forme solide : préparez au moment de l'emploi. Il résiste mieux en milieu légèrement acide et se dégrade vite à pH alcalin, à l'inverse du NADH. Une solution neutre conservée à 2-8 °C se compte en jours, en aliquotes à -20 °C en quelques semaines.

Après reconstitution

Au réfrigérateur, entre 2 et 8 °C, à l'abri de la lumière. La solution se garde nettement moins longtemps que la poudre. Pour un stockage long, répartissez-la en aliquotes à usage unique et congelez-les : chaque cycle de congélation et décongélation dégrade un peu le peptide.

Manipulation

Pesez rapidement, la poudre captant l'humidité ambiante, et refermez le flacon sous dessiccant. Dissolvez dans de l'eau de qualité laboratoire ou un tampon, à froid de préférence, sans chauffer ni passer longuement au vortex. Contrôlez le pH de la solution finale et évitez les tampons alcalins. Aliquotez et congelez immédiatement, en limitant les cycles. L'état d'une solution se vérifie par spectrophotométrie : le NAD+ absorbe à 259 nm, et l'apparition d'une bande à 340 nm signale la forme réduite. Réservé à un usage de recherche en laboratoire.

Et pour un autre volume d'eau

Le calculateur est pré-rempli sur un flacon de 500 mg. Changez le volume d'eau pour voir ce que donne chaque prélèvement, lu en graduations de seringue à insuline.

Le flacon

1232.5 ml200.00 mg/ml

La seringue — Prélèvement montré : 1 mg

0204060801000.5 u · 0.005 ml

Ce que donnent quelques prélèvements

PrélèvementGraduationsLecture
0.1 mg0.1trop fine
0.25 mg0.1trop fine
0.5 mg0.3trop fine
1 mg0.5trop fine
2 mg1trop fine
5 mg2.5acceptable
  • Moins de deux graduations : la précision de lecture pèserait plus que le prélèvement lui-même. Diluez davantage.
  • Au-delà de 20 mg/ml, la dissolution est lente et les petits prélèvements deviennent difficiles à lire.

Calcul de dilution. Il dit combien de liquide prélever pour un nombre de milligrammes donné — rien d'autre. Produits réservés à la recherche en laboratoire.

Procédure

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